{"id":7523,"date":"2022-03-01T23:57:26","date_gmt":"2022-03-01T23:57:26","guid":{"rendered":"https:\/\/factor-h.org\/?p=7523"},"modified":"2022-06-26T18:47:28","modified_gmt":"2022-06-26T18:47:28","slug":"chdis-conference-session-ii-seminars-by-drs-sandrine-humbert-rafaelle-iennaco-baljit-khakh","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/factor-h.org\/pt\/chdis-conference-session-ii-seminars-by-drs-sandrine-humbert-rafaelle-iennaco-baljit-khakh","title":{"rendered":"Confer\u00eancia do CHDI (Sess\u00e3o II) \u2013 Semin\u00e1rios dos Drs. Sandrine Humbert, Rafaelle Iennaco e Baljit Khakh"},"content":{"rendered":"

Sandrine Humbert do INSERM, Grenoble Institute for Neurosciences<\/strong>, falou sobre o papel do tipo selvagem HTT no desenvolvimento do c\u00e9rebro. Sandrine postula que um componente significativo da patog\u00eanese da DH envolve a perda da fun\u00e7\u00e3o da(s) fun\u00e7\u00e3o(\u00f5es) HTT normal(is), que envolvem, entre outras fun\u00e7\u00f5es, a montagem de complexos moleculares, incluindo aqueles transportados por microt\u00fabulos, e no contexto da ciliog\u00eanese. Ela tamb\u00e9m especula que um evento patol\u00f3gico prim\u00e1rio \u00e9 a perda de suporte aferente cortical para os neur\u00f4nios de produ\u00e7\u00e3o espinhosa do estriado, em parte por uma perda de suporte neurotr\u00f3fico impulsionado pela sinaliza\u00e7\u00e3o de BDNF\/TrkB. Sandrine revisou o trabalho anterior que sustentava essas hip\u00f3teses, que d\u00e3o credibilidade ao conceito de que as fun\u00e7\u00f5es de desenvolvimento do HTT s\u00e3o afetadas na DH. Um dos principais efeitos da perda do HTT normal durante o desenvolvimento s\u00e3o as altera\u00e7\u00f5es na progress\u00e3o do ciclo celular durante a neurog\u00eanese (menos neur\u00f4nios sendo gerados) e mudan\u00e7as na polaridade neuronal, que se refletem em muitos contextos diferentes durante o desenvolvimento dos neur\u00f4nios corticais, inclusive na morfologia dendr\u00edtica em neur\u00f4nios p\u00f3s-mit\u00f3ticos.<\/p>\n\n\n\n

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Dra. Sandrine Humbert explica o papel do HTT normal no desenvolvimento cortical<\/figcaption><\/figure>\n\n\n\n

Alguns dos d\u00e9ficits observados nos nocautes de HTT de roedores parecem ser encontrados tamb\u00e9m em an\u00e1lises histol\u00f3gicas realizadas em tecidos fetais humanos, embora o tamanho da amostra seja pequeno. Parece haver evid\u00eancias convergentes de uma mudan\u00e7a na localiza\u00e7\u00e3o do HTT na DH e uma mudan\u00e7a na polaridade celular no in\u00edcio do desenvolvimento do c\u00f3rtex, bem como em d\u00e9ficits no n\u00famero e na morfologia dos c\u00edlios nas c\u00e9lulas progenitoras corticais. Outras observa\u00e7\u00f5es aparentemente compartilhadas entre modelos de roedores e indiv\u00edduos com DH incluem agenesia parcial do corpo caloso (ou seja, que parte da bem conhecida perda de fibras calosas na DH se deve a um problema de crescimento axonal durante o desenvolvimento). Sandrine ent\u00e3o descreveu o papel da prote\u00edna NUMA1 nos d\u00e9ficits do cone de crescimento axonal em neur\u00f4nios derivados de modelos de camundongos knock-in. A superexpress\u00e3o de NUMA1 em camundongos Q111 pode restaurar os d\u00e9ficits de desenvolvimento caloso neste modelo. Eles tamb\u00e9m mostraram que a epotilonaB, um produto natural que interfere na polimeriza\u00e7\u00e3o da tubulina e tamb\u00e9m leva a melhorias na estrutura calosa neste modelo.<\/p>\n\n\n\n

RAFAELLE LENNACO<\/h2>\n\n\n\n

Rafaelle Iennaco (p\u00f3s-doutorado do grupo da Dra. Elena Cattaneo), University of Milano<\/strong> falou sobre o papel de res\u00edduos espec\u00edficos dentro do exon-1 do gene HTT na modula\u00e7\u00e3o de sua fun\u00e7\u00e3o. Rafaelle projetou c\u00e9lulas-tronco de camundongos expressando v\u00e1rias dele\u00e7\u00f5es e muta\u00e7\u00f5es pontuais no gene HTT e sua rela\u00e7\u00e3o com sua fun\u00e7\u00e3o de desenvolvimento. Na evolu\u00e7\u00e3o, o n\u00famero de repeti\u00e7\u00f5es CAG come\u00e7a a aumentar em aves, r\u00e9pteis, peixes e anf\u00edbios (4Qs), enquanto nos mam\u00edferos o intervalo \u00e9 entre 5-35 repeti\u00e7\u00f5es CAG. O N17 \u00e9 muito conservado, mas o dom\u00ednio poli-prolina (o 'PRD') tamb\u00e9m \u00e9 altamente divergente ao longo da evolu\u00e7\u00e3o, que s\u00f3 aparece em mam\u00edferos. No entanto, o papel dessas 3 regi\u00f5es e a import\u00e2ncia de res\u00edduos espec\u00edficos n\u00e3o foram suficientemente aprofundados. Portanto, eles projetaram um grande conjunto de c\u00e9lulas MES que expressam v\u00e1rios comprimentos do trato polyCAG (Q = 0, 2, 4, 7, 17 etc.) e mostraram afetar um defeito de desenvolvimento precoce observado na cultura. eles tamb\u00e9m identificaram um conjunto de genes cuja express\u00e3o se correlacionava com o n\u00famero de CAGs na faixa normal, revelando genes implicados no desenvolvimento do sistema nervoso. <\/p>\n\n\n\n

A pr\u00f3xima etapa da apresenta\u00e7\u00e3o focou na compreens\u00e3o do papel patog\u00eanico do mutante humano HTT (mais patog\u00eanico que o \u00e9xon 1 do camundongo). Eles compararam os mesmos intervalos patog\u00eanicos de repeti\u00e7\u00f5es CAG no contexto humano versus o contexto do camundongo, no contexto da morfologia de 'cistos' neuronais e em morfologias dendr\u00edticas em cultura, apoiando que as sequ\u00eancias humanas s\u00e3o importantes para desencadear esses d\u00e9ficits. Uma vez que as principais altera\u00e7\u00f5es entre o exon-1 do HTT de camundongo e humano residem na regi\u00e3o de poliprolina, um conjunto de c\u00e9lulas-tronco knock-in foi gerado onde as regi\u00f5es de polipro foram trocadas entre humano e camundongo. a regi\u00e3o de poliprolina humana \u00e9 importante para a patog\u00eanese nesses dois sistemas. A regi\u00e3o humana piora e a regi\u00e3o do camundongo melhora os fen\u00f3tipos descritos.<\/p>\n\n\n\n

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Dr. BALJIT CAQUI<\/h2>\n\n\n\n

Dr. Baljit Khaki da UCLA<\/strong> descreveu seu trabalho sobre o impacto patog\u00eanico do mHTT em modelos de camundongos R6\/2 e Q175, em termos de d\u00e9ficits espec\u00edficos de c\u00e9lulas, comparando o papel patog\u00eanico do mHTT em astr\u00f3citos versus neur\u00f4nios no corpo estriado (em n\u00edvel fisiol\u00f3gico, molecular e comportamental) . Mal \u00e9 um l\u00edder mundial em fisiologia de astr\u00f3citos e seu papel nas fun\u00e7\u00f5es normais do c\u00e9rebro e na doen\u00e7a. Neste semin\u00e1rio, Bal mostrou que muitos desses d\u00e9ficits podem ser evitados\/restaurados depois que as c\u00e9lulas estriadas s\u00e3o expostas a um repressor de prote\u00edna dedo de zinco (ZFP) espec\u00edfico para mHTT que inibe a express\u00e3o de mHTT especificamente sem afetar a express\u00e3o normal de HTT. A novidade de seu trabalho recente \u00e9 o fato de sua equipe expressar o mHTT ZFP apenas em neur\u00f4nios ou apenas em astr\u00f3citos, e ser capaz de analisar o impacto da supress\u00e3o do mHTT em termos de mecanismos aut\u00f4nomos de c\u00e9lulas versus n\u00e3o aut\u00f4nomos celulares - apontando, portanto, para o tipo de c\u00e9lula mais importante na condu\u00e7\u00e3o de mecanismos patog\u00eanicos. Ou seja, diminuir mHTT em astr\u00f3citos e estudar efeitos em astr\u00f3citos e em neur\u00f4nios (que ainda expressam mHTT), e vice-versa. Seus resultados suportam de forma esmagadora que, em modelos de HD de camundongos, a express\u00e3o neuronal de mHTT \u00e9 o evento mais significativo na condu\u00e7\u00e3o da progress\u00e3o da doen\u00e7a, e que a maioria das altera\u00e7\u00f5es de astr\u00f3citos s\u00e3o adaptativas aos d\u00e9ficits desencadeados em neur\u00f4nios estriatais por mHTT.<\/p>\n\n\n\n

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Bal tamb\u00e9m descreve o fato de que GPCRs astroc\u00edticos que sinalizam via acoplamento Gi podem restaurar parcialmente os sintomas da doen\u00e7a em v\u00e1rios modelos de HD, demonstrando que esta \u00e9 uma estrat\u00e9gia terap\u00eautica potencialmente valiosa. Ele expandiu esses esfor\u00e7os anteriores, publicados em 2021, para estudar o papel dos efeitos de supress\u00e3o do mHTT em neur\u00f4nios versus astr\u00f3citos para entender os mecanismos pelos quais o mHTT contribui para a doen\u00e7a e os tipos de c\u00e9lulas mais importantes para a doen\u00e7a. As ZFPs foram expressas em v\u00edrus AAV e usadas extensivamente na Vivo<\/em> em v\u00e1rios est\u00e1gios de desenvolvimento da doen\u00e7a. Uma mensagem importante \u00e9 que as altera\u00e7\u00f5es nos astr\u00f3citos relacionadas ao metabolismo do colesterol s\u00e3o confirmadas e que essa via pode ser resgatada de forma aut\u00f4noma pelas c\u00e9lulas quando o mHTT \u00e9 suprimido nos astr\u00f3citos. O laborat\u00f3rio de Bal tamb\u00e9m usou t\u00e9cnicas eletrofisiol\u00f3gicas para mostrar a restaura\u00e7\u00e3o do disparo anormal e das propriedades celulares ap\u00f3s a redu\u00e7\u00e3o do mHTT neuronal, mas n\u00e3o astroc\u00edtica.<\/p>\n\n\n\n

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Um conjunto final de experimentos foi reduzir o mHTT em todo o c\u00e9rebro usando o AAV PHPeb para direcionar a express\u00e3o do ZFP. Este tratamento mostrou melhorar as medidas da doen\u00e7a em camundongos R6.2, um modelo muito agressivo de HD. Esses estudos tamb\u00e9m mostraram que a express\u00e3o neuronal de ZFP, mas n\u00e3o astroc\u00edtica. express\u00e3o resgata os d\u00e9ficits comportamentais por m\u00faltiplos pontos finais (aninhamento, campo aberto, aperto, etc.).<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

Sandrine Humbert from INSERM, Grenoble Institute for Neurosciences, spoke about the role of wild type HTT in brain development. Sandrine postulates that a significant component of HD pathogenesis involves the loss of function of normal HTT function(s), which involve, among other roles, the assembly of molecular complexes, including those transported by microtubules, and in the […]<\/p>\n","protected":false},"author":3,"featured_media":7496,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"_monsterinsights_skip_tracking":false,"_monsterinsights_sitenote_active":false,"_monsterinsights_sitenote_note":"","_monsterinsights_sitenote_category":0,"footnotes":""},"categories":[9,29],"tags":[192,188,194,191,195,193],"class_list":["post-7523","post","type-post","status-publish","format-standard","has-post-thumbnail","hentry","category-general-news","category-research","tag-baljit-khakh","tag-chdi-foundation","tag-elena-cattaneo","tag-hdtc2022","tag-rafaelle-iennaco","tag-sandrine-humbert"],"aioseo_notices":[],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/factor-h.org\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/7523","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/factor-h.org\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/factor-h.org\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/factor-h.org\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/users\/3"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/factor-h.org\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=7523"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/factor-h.org\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/7523\/revisions"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/factor-h.org\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/media\/7496"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/factor-h.org\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=7523"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/factor-h.org\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=7523"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/factor-h.org\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=7523"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}