{"id":7572,"date":"2022-03-02T18:39:27","date_gmt":"2022-03-02T18:39:27","guid":{"rendered":"https:\/\/factor-h.org\/?p=7572"},"modified":"2022-06-26T18:45:50","modified_gmt":"2022-06-26T18:45:50","slug":"session-iii-chdi-conference-drs-gene-yeo-and-irina-antonijevic","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/factor-h.org\/pt\/session-iii-chdi-conference-drs-gene-yeo-and-irina-antonijevic","title":{"rendered":"Sess\u00e3o III Confer\u00eancia do CHDI: Drs. Gene Yeo e Irina Antonijevic"},"content":{"rendered":"

Dr. Gene Yeo da UCSD<\/strong> falou sobre seu trabalho recente no direcionamento da degrada\u00e7\u00e3o do RNA usando Crispr-Cas13d. Seu laborat\u00f3rio se concentrou em prote\u00ednas de liga\u00e7\u00e3o ao RNA (RBPs) como reguladores da express\u00e3o g\u00eanica e como alvos de drogas. Ele desenvolveu m\u00e9todos para estudar sistematicamente as fun\u00e7\u00f5es RBP, como o m\u00e9todo eCLIP aprimorado, que seu laborat\u00f3rio fez para caracterizar mais de 200 RBPs. Ele tamb\u00e9m desenvolveu m\u00e9todos para rastrear o RNA usando imagens ao vivo em c\u00e9lulas individuais. Seus m\u00e9todos foram usados para direcionar RNAs de expans\u00e3o repetida usando a tecnologia Crispr-Cas. Recentemente, ele se concentrou no uso da enzima Cas13d para degradar RNAs espec\u00edficos, incluindo HTT, visando a repeti\u00e7\u00e3o CAG. O sistema Cas13d\/cripsr pode caber em AAVs e, portanto, pode ser usado para estudos in vivo sem ter que usar um sistema de vetor duplo. Ele mostrou que esse sistema pode degradar o RNA do HTT e corrigir algumas das altera\u00e7\u00f5es moleculares encontradas nas iPSCs HD, em uma colabora\u00e7\u00e3o entre seu laborat\u00f3rio e o laborat\u00f3rio da Dra. Leslie Thompson.<\/p>\n\n\n\n

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Gene passou a descrever que seu sistema tem menos efeitos fora do alvo em outros genes repetidos contendo CAG. Experimentos com roedores com AAV-Cas13d\/CAGEx em Q175s podem melhorar os efeitos comportamentais neste modelo, diminuir a patologia agregada HTT e tamb\u00e9m restaurar o volume estriatal. O efeito no Q175s parecia ser espec\u00edfico do alelo, j\u00e1 que nenhuma altera\u00e7\u00e3o no HTT de camundongo selvagem foi detectada por Western blots, sem evid\u00eancia de inflama\u00e7\u00e3o ou efeitos fora do alvo. Seu laborat\u00f3rio agora est\u00e1 se concentrando em outros RBPs humanos para melhorar o desenvolvimento terap\u00eautico humano. An\u00e1lise adicional significativa est\u00e1 faltando em minha opini\u00e3o em termos de especificidade da abordagem e sua aplicabilidade para o desenvolvimento terap\u00eautico, mas esta abordagem \u00e9 significativa na medida em que visa o RNA em vez do DNA usando crispr (portanto, n\u00e3o editando permanentemente o genoma, incluindo locais), permitindo potencial segmenta\u00e7\u00e3o espec\u00edfica do alelo que pode ser melhor tolerada.<\/p>\n\n\n\n

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Dra. Irina Antonijevic da Triplet Therapeutics<\/strong> descreveram seu trabalho no desenvolvimento de um oligonucleot\u00eddeo terap\u00eautico antisense (ASO) direcionado ao gene Msh3, um gene cr\u00edtico que controla a expans\u00e3o som\u00e1tica da repeti\u00e7\u00e3o HTT CAG no c\u00e9rebro, conforme identificado por estudos de GWA (associa\u00e7\u00e3o ampla do genoma). Inicialmente, o Msh3 demonstrou regular a instabilidade som\u00e1tica do gene HTT em camundongos, e os estudos de associa\u00e7\u00e3o gen\u00e9tica humana apoiaram a conserva\u00e7\u00e3o da fun\u00e7\u00e3o do Msh3 no controle da taxa de expans\u00e3o da repeti\u00e7\u00e3o CAG e da idade de in\u00edcio do diagn\u00f3stico motor em indiv\u00edduos com DH.<\/p>\n\n\n\n

O SHIELD-HD<\/strong> \u00e9 um estudo de hist\u00f3ria natural conduzido pela Triplet que incluiu 70 indiv\u00edduos em 9 locais em 5 pa\u00edses (EUA, Canad\u00e1, Fran\u00e7a, Alemanha e Reino Unido). O estudo ter\u00e1 uma dura\u00e7\u00e3o de 2 anos e apoiar\u00e1 o estudo planejado de Fase 1\/2a com a ASO. Irina descreveu os dados iniciais sobre as altera\u00e7\u00f5es estruturais da resson\u00e2ncia magn\u00e9tica no volume caudado e no volume ventricular durante o estudo longitudinal durante um per\u00edodo de 48 semanas, sugerindo que a imagem pode ser adequada como um ponto final de biomarcador a ser rastreado. As medi\u00e7\u00f5es do PIN HD incluem uma composi\u00e7\u00e3o da pontua\u00e7\u00e3o motora total, SDMT (teste de modalidade de d\u00edgito \u00fanico) e pontua\u00e7\u00f5es do avaliador, e tamb\u00e9m mostraram mudan\u00e7as ao longo do per\u00edodo monitorado at\u00e9 o momento. Eles tamb\u00e9m est\u00e3o medindo os n\u00edveis de NFL (cadeia leve de neurofilamentos) no LCR, mas ela n\u00e3o relatou resultados.<\/p>\n\n\n\n

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Irina ent\u00e3o descreveu o trabalho recente em NHPs, o trabalho feito para promover o TTX-3360, o candidato cl\u00ednico ASO. A extens\u00e3o da supress\u00e3o de Msh3 ap\u00f3s a administra\u00e7\u00e3o de ICV \u00e9 grande e sustentada por um per\u00edodo de 24 semanas (>50% supress\u00e3o \u00e9 o alvo para Msh3, com base no trabalho em roedores sugerindo que esse n\u00edvel de supress\u00e3o deve modular SI da repeti\u00e7\u00e3o HTT CAG). Finalmente, eles descreveram o trabalho de biomarcador feito em TTX-3360 usando medi\u00e7\u00f5es no LCR de mRNA Msh3 contido dentro de exossomos derivados do c\u00e9rebro (ves\u00edculas extracelulares). As amostras SHIELD-HD de CSF foram essenciais para o desenvolvimento do ensaio para detectar os n\u00edveis de Msh3 e altera\u00e7\u00f5es ap\u00f3s a administra\u00e7\u00e3o de ASO. A plataforma final incluiu an\u00e1lise qPCR para detec\u00e7\u00e3o de mRNA em LCR humano e primata. Os genes de controle dom\u00e9stico incluem HKG, ActB e EEF2 para normaliza\u00e7\u00e3o das altera\u00e7\u00f5es no CSF ap\u00f3s os tratamentos. O uso desses genes de controle foi corroborado com as amostras de LCR do estudo SHIELD-HD, garantindo que n\u00e3o houve altera\u00e7\u00e3o em indiv\u00edduos n\u00e3o tratados ao longo do tempo. Nos estudos de NHP, a coleta de LCR na cisterna magna foi melhor para a detec\u00e7\u00e3o de Msh3 do que as coletas via coleta intratecal (lombar) de LCR. Isso est\u00e1 pendente de confirma\u00e7\u00e3o em estudos de cole\u00e7\u00e3o humana. Eles tamb\u00e9m mediram a express\u00e3o de Msh3 saud\u00e1vel e HD em ves\u00edculas de LCR, que n\u00e3o mudaram com a doen\u00e7a (mas o tamanho da amostra foi pequeno). Existe uma variabilidade de 2\/3 vezes na express\u00e3o entre os indiv\u00edduos medidos. Nenhum dado longitudinal foi analisado ainda, embora esta seja uma \u00e1rea cr\u00edtica de trabalho.<\/p>\n\n\n\n

Ali\u00e1s, eles relatam que a distribui\u00e7\u00e3o de tamanho das ves\u00edculas extracelulares isoladas do LCR muda no curso da doen\u00e7a \u2013 ent\u00e3o esse \u00e9 um aspecto que eles querem aprofundar. Nenhum dado foi apresentado ainda in vivo, de que a dosagem de ASO altera os n\u00edveis de Msh3 em EVs do LCR que se correlacionam com a redu\u00e7\u00e3o do par\u00eanquima do alvo. Este \u00e9 o estudo cr\u00edtico que est\u00e1 pendente. <\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

Dr. Gene Yeo from UCSD spoke about his recent work on targeting RNA degradation using Crispr-Cas13d. His lab focused on RNA binding proteins (RBPs) as regulators of gene expression, and as drug targets. He has developed methods to systematically study RBP functions, such as the enhanced eCLIP method, which his lab has done to characterize […]<\/p>\n","protected":false},"author":3,"featured_media":7496,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"_monsterinsights_skip_tracking":false,"_monsterinsights_sitenote_active":false,"_monsterinsights_sitenote_note":"","_monsterinsights_sitenote_category":0,"footnotes":""},"categories":[9,29],"tags":[188,200,158,191,203,205,204,202,201],"class_list":["post-7572","post","type-post","status-publish","format-standard","has-post-thumbnail","hentry","category-general-news","category-research","tag-chdi-foundation","tag-gene-yeo","tag-hd","tag-hdtc2022","tag-irina-antonijevic","tag-msh3","tag-somatic-instability","tag-triplet-therapeutics","tag-ucsd"],"aioseo_notices":[],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/factor-h.org\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/7572","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/factor-h.org\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/factor-h.org\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/factor-h.org\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/users\/3"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/factor-h.org\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=7572"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/factor-h.org\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/7572\/revisions"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/factor-h.org\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/media\/7496"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/factor-h.org\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=7572"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/factor-h.org\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=7572"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/factor-h.org\/pt\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=7572"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}